产品名称 | 产品编号 | 规格 |
2×PCR mix(with Dye) | SYT109 | 1ml |
产品描述
2× PCR Mix(with Dye)是一款具有优异特性普适性的PCR试剂,能够适用于不同物种、不同类型、不同GC 含量的DNA模板的高效扩增,含有 Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、MgCl2以及优化的缓冲体系。反应时只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤。可有效扩增10Kb以下片段。PCR产物具有3’-dA突出端,可轻松克隆至T载体。
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃保存,有效期 1年。
使用说明
反应体系(50 μL)
组分 | 体积(μL) |
模板DNA | 适量 |
引物1(10 μM) | 2 |
引物2(10 μM) | 2 |
2×Hieff® PCR Master Mix | 25 |
H2O | to 50 |
扩增程序
循环步骤 | 温度(℃) | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94 | 5 min | 1 |
变性 | 94 | 30 sec | 35 |
退火 | 50-60 | 30 sec |
延伸 | 72 | 30 sec/kb |
终延伸 | 72 | 10 min | 1 |
【注】:使用前请务必将其彻底混匀。
a)模板使用量:基因组DNA:50-200 ng;质粒DNA:0.1-10 ng。
b)Mg2+浓度:本产品中含有3 mM的MgCl2,适合大部分PCR反应。
c)退火温度:请参考引物的理论Tm值,退火温度可设置低于引物理论值2-5℃。
d)延伸时间:分子鉴定建议30 sec/kb。基因克隆建议60 sec/kb,以保证产物量达到最高。
注意事项
1.本产品仅作科研用途。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。