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Quant 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA digester plus)反转录试剂盒
所属系列 : 分子系列> 逆转录系列 
产品货号 : SYT-012-2
产品储存 : -20℃保存
产品规格 : 100T
产品价格 : 738元
  产品介绍:

产品名称

产品编号

规格

Quant  1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA digester plus)

SYT-012-2

100 T

产品描述



Quant 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA digester plus)是基于 Quant Reverse Transcriptase 而开发,能高效合成第一链cDNA 合成试剂盒(含去基因组)。

1、该酶热稳定性大幅度提高,可耐受高达 50℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA 模板的逆转录。

2、该酶增强了与模板的亲和力,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。

3、扩增片段10 kb

4、去除 RNA 模板中残留的基因组DNA 污染,保证后续结果更加可靠。

产品组分

编号

组分

产品编号(规格) SYT-012-2 (100 T)

SYT012-A

RNase free ddH2O

1 mL×2

SYT012-B

5×gDNA digester Buffer

200 μL

SYT012-C

gDNA digester

100 μL

SYT012-D

2×Quant Synthesis Mix

1 mL

【注】:12×Quant  Synthesis Mix包含RNase inhibitor

运输与保存方式

干冰运输。-20℃保存,有效期 18 个月。

注意事项

1) gDNA digester  2×Quant Synthesis Mix 含有高浓度的甘油,使用前请短暂离心,吹打混匀。

2) 建议 RNA 是溶于水而不是TE Buffer 中,因为 TE Buffe 会干扰 gDNA 去除以及逆转录反应。

3) 可不经过基因组去除步骤,直接进行逆转录,这样所得到的结果与使用Quant 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (Cat No. SYT-002) 效果一致。但是请勿将 gDNA digester  SYT-002 中的 2×Quant Synthesis Mix 配套使用,因其不含终止gDNA digester 反应的成分,会影响反转录和后续的 qPCR 实验。

4) 反应液的配制应在冰上操作完成,操作过程应避免 RNase 污染。

5) 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

第一链 cDNA 合成操作步骤

1、RNase free 离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。42℃孵育 2 min

组分

使用量

RNase free ddH2O

To 10 μL

5×gDNA digester Buffer

2 μL

gDNA digester

1 μL

Total RNA

1 ng -5 μg*

or mRNA

1 ng-500 ng*


【注】:* 若后续实验为 qPCRTotal RNA 投入量为 1 ng -1 μgmRNA 的投入量为 1 ng-100 ng。若基因的表达丰度很低, 最多可投入 5 ug Total RNA 500 ng mRNA

2、逆转录反应体系配制(20 μL 体系)

组分

使用量

上一步的反应液

10 μL

2×Quant Synthesis Mix

10 μL


3、逆转录程序设置

温度

时间

25

5 min

42

30 min

85

5 min

】:逆转录温度:推荐使用 42℃。对于高 GC 含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到 50℃。

1. 逆转录产物可以-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。


 
 
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