实验目的

ELISA可以用于测定抗原，也可用于测定抗体。

实验原理

ELISA 是一种结合抗原、抗体特异性反应和酶对底物高效催化作用的高敏感性免疫学实验技术。ELISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应，洗涤使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开，再加入酶标记的抗原或抗体，通过反应使其结合在固相载体上。此时固相上的酶含量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。

实验步骤

样本要求

1.客户需提供新鲜或正确保存的待检测样本，最好是液态类的样本(细胞培养上清、组织匀浆、血清、血浆、尿液、胸水、腹水、脑脊液等)，样本量120μl/孔，建议提供足量样本＞500μl；

a)细胞培养上清：离心去除沉淀，收集上清。

b)血清、血浆：推荐提供血浆，一般不加抗凝剂，收集全血后立即离心，若必须使用抗凝剂，建议使用EDTA，避免使用肝素钠、柠檬酸溶液。收集血浆后，建议分装保存，-70℃保存。样本应避免溶血，避免反复冻融，不接受高脂样本。

c)组织匀浆：建议液氮研磨，加入蛋白酶抑制剂。

d)细胞匀浆：建议加入蛋白酶抑制剂。

2.客户需提供待检测样本详细信息：如种属来源、样本类型等；

3.样本应避免各类污染和反复冻融。

实验数据

1完整实验报告(包括详细实验步骤)；

2原始数据、图片与结果分析。

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