实验目的

Tunel染色法可运用于组织切片、贴壁细胞与悬浮细胞等各种类样本进行凋亡检测的常用实验方法。

实验原理

Tunel实验法为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法，晚期凋亡细胞中染色体DNA双链或单链断裂产生粘性3'-OH末端，在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化下，将带有荧光素分子的dUTP标记到DNA的3'-末端，然后通过荧光显微镜观察、或进而用带有HRP的一抗染色后DAB显色，可以进行凋亡细胞的检测。

实验步骤

样本要求

客户需提供样品：新鲜或妥善保存的组织、细胞

a) 细胞悬液或贴壁细胞：每份样本至少 1×10⁶ 个细胞，在运输前将培养液充满整个

容器，25T细胞瓶常温运输。

b) 组织样本：用于石蜡包埋的组织，活检或手术切除标本应在2小时内取材或固定，

避免组织自溶及抗原变性等影响免疫组化结果。用于冰冻切片的组织，取材后应立即液氮速冻，-80℃保存。组织块较理想的体积为 2.0cm×2.0cm×0.3cm。

c) 组织切片：切片厚度一般4μm，特殊组织厚度可达10 μm。

d) 客户需提供待检测样本详细信息：如种属来源、样本类型等。

e) 样本应避免各类污染和反复冻融。

f) 因不同凋亡检测方法，样品处理要求有所不同，具体可咨询水云天技术服务人员。

实验数据

1 染色片子

2 原始图像

3 结果分析

4 完整详细、客观的实验报告单

服务项目表